X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷

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X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷，IPTG，β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal），藍(lán)白斑篩選，CAS：7240-90-6

產(chǎn)品信息：
 

產(chǎn)品描述：

X-Gal，英文全名5-Bromo-4-chloro-3-indoxyl-beta-D-galactopyranoside，中文全名5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-吡喃半乳糖苷，CAS NO：7240-90-6，是β-半乳糖苷酶（β-gal，beta-gal）的組織化學(xué)顯色底物，能被水解生成半乳糖和5-溴-4-氯-3-羥基吲哚。5-溴-4-氯-3-羥基吲哚是一種可溶、無色的吲哚水解產(chǎn)物，隨后通過二聚合和氧化反應(yīng)，被轉(zhuǎn)化為一不可溶藍(lán)色產(chǎn)物-5,5’-二溴-4,4’-二氯靛藍(lán)。
 

X-Gal是分子生物克隆實(shí)驗(yàn)中用來檢測(cè)β-gal活性的一種主流試劑，可用來檢測(cè)外源DNA是否插入質(zhì)粒DNA的lacZ區(qū)。當(dāng)外源DNA成功插入lacZ區(qū)，會(huì)破壞β-gal的α-互補(bǔ)，導(dǎo)致其活性喪失，則無法水解X-Gal使得菌落呈白色。而保留β-gal正常活性的細(xì)菌能產(chǎn)生藍(lán)色菌落。許多其它應(yīng)用也常將X-Gal用作底物來檢測(cè)β-gal活性，這些應(yīng)用包括：1）β-gal-抗體連接的免疫分析和免疫組化；2）基于β-gal誘導(dǎo)的大腸桿菌噬菌體檢測(cè)；3）腫瘤進(jìn)展微轉(zhuǎn)移形成的檢測(cè)。
 

X-Gal常常與IPTG（貨號(hào)：MF2002-5G）聯(lián)合使用進(jìn)行藍(lán)白斑克隆篩選。本品達(dá)分子生物學(xué)級(jí)別。

基本特性：

1）   CAS NO：7240-90-6
2）   英文同義名：5-Bromo-4-chloro-3-indolyl β-D-galactoside; X-b-D-Galactoside; BCIG; X-Gal;
3）   分子式：C₁₄H₁₅BrClNO₆  
4）  分子量：408.63 g/mol

5）   純度：≥99%

6）   外觀：白色至類白色或無色粉末

7）   溶解性：溶于DMF（20mg/ml），DMSO

8）   化學(xué)結(jié)構(gòu)：

保存與運(yùn)輸方法

保存：-20℃避光干燥保存，2年有效。

運(yùn)輸：冰袋運(yùn)輸。

使用方法

1、   X-Gal儲(chǔ)存液配制

稱取0.2g X-Gal裝入15ml離心管，加入10ml DMF，震蕩使其充分溶解。按照1ml/管分裝，并用鋁箔紙包裹離心管使其避光，置于-20℃凍存，正常情況下6-12個(gè)月穩(wěn)定。

2、   IPTG儲(chǔ)存液配制

稱取0.238g IPTG（貨號(hào)：MF2002-5G）溶于10ml去離子水中，充分溶解混勻后，經(jīng)0.22μm濾膜過濾除菌，即得到100mM（100×）的儲(chǔ)存液。按照1ml/管分裝，置于-20℃凍存，高達(dá)一年穩(wěn)定。

3、藍(lán)白斑篩選方法【詳見maokangbio】

X-Gal常與IPTG聯(lián)合使用進(jìn)行藍(lán)白斑克隆篩選。

注意事項(xiàng)

1）X-gal的守選溶劑為DMF。若使用DMSO作為溶劑，選擇相對(duì)新鮮且高質(zhì)量的DMSO極為重要，持續(xù)性的研究發(fā)現(xiàn)由于使用舊或低質(zhì)量DMSO造成很多問題。建議大部分實(shí)驗(yàn)都用DMF作為溶劑。

2）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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— — Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】

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X-Gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷

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